作者：汤庆; 徐辉雄; 吕明德; 岳殿超; 李宝金; ...血管内皮细胞超声辐照增强绿色荧光蛋白声诺维实验研究sonovue增强型绿色荧光蛋白pegfp流式细胞仪检测huvec报告基因质粒细胞活性细胞生存率转染效率照射条件瞬时转染染色检测基因转染造影剂多普勒
摘要：目的探讨造影剂声诺维(SonoVue)联合超声辐照人脐血管内皮细胞(HUVEC)时增强型绿色荧光蛋白报告基因质粒(pEGFP)的瞬时转染效率.方法使用连续多普勒超声辐照方式介导pEGFP转染HUVEC,照射条件为频率1.9 MHz,TIS 0.8,ⅠSATA为80.0 mW/cm2,时间持续5 min,添加或不添加2% SonoVue,pEGFP浓度为50 μg /ml.48 h后用流式细胞仪检测绿色荧光蛋白(GFP)瞬时转染表达率,并用台盼蓝染色检测细胞活性(生存率).结果单纯超声辐照组GFP转染率仅为1.5%±0.2%,SonoVue联合超声辐照组为16.1%±1.9%(P＜0.001);两组细胞生存率分别为94.1%±2.3%和91.1%±4.1%(P＞0.05).结论 SonoVue联合超声辐照条件可增强pEGFP转染HUVEC的效率,而对细胞活性无明显影响,此方法可用于目的基因转染.
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