作者：方志辉; 周鹰飞非病毒载体lip2000人骨形态发生蛋白2大鼠骨折愈合成骨细胞
摘要：目的 探讨非病毒载体LipofectamineTM2000（Lip2000）介导人骨形态发生蛋白2（BMP2）基因体内转染骨髓间充质干细胞（BMSCs）促进大鼠骨折愈合的效果。方法 20只大鼠建立股骨骨折模型,根据随机抽签原则分为观察组与对照组大鼠各10只。观察组大鼠股骨骨折断端间隙局部注射Lip2000转染BMP2：注射Lip2000后取大鼠红骨髓,将传代培养后生长旺盛的红骨髓细胞与BMP2转染试剂的混合物（聚乙烯亚胺和BMP2基因质粒的混合液）在细胞培养液中培养以转染BMSCs,转染后再植入骨折部位。对照组骨折断端注射相同体积生理盐水。观察骨折愈合情况,回滴定法测定骨密度,Western blot法检测BMP2在骨折间软组织中的相对表达水平。结果 大体标本观察发现观察组骨痂生成量多于对照组。X线显示观察组基因转染处的骨折线较对照组明显模糊。观察组大鼠的骨密度随基因转染的时间增加（转染后1周→转染后8周）而增加[（0.32±0.09）mg/cm^3vs（0.39±0.11）mg/cm^3,P〈0.05],但在转染后1周[（0.32±0.09）mg/cm^3vs（0.26±0.11）mg/cm^3,P〈0.01]和转染后8周[（0.39±0.11）mg/cm^3vs（0.22±0.21）mg/cm^3,P〈0.01]观察组的骨密度均高于对照组。Western blot检测分析显示基因转染1周与8周后,观察组的BMP2相对表达水平均明显高于对照组。结论 Lip2000介导BMP2基因进入大鼠的BMSCs中可诱导其向成骨细胞分化,促进骨折后骨小梁形成和缩短骨折愈合时间。
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