作者：肖海娟; 杨林; 徐鹏飞; 张亚密; 张妮; 王...同源异型盒基因b7结直肠癌侵袭转移机制
摘要：目的研究同源异型盒基因B7（HOXB7）介导Wnt／β-Catenin信号通路在结直肠癌侵袭转移中的作用与机制。方法构建慢病毒转染重组体质粒HOXB7／psin，包装质粒PIK和阴性对照质粒psin，通过转染技术获得稳定过表达HOXB7的结直肠癌细胞株（SW480／HOXB7，293FT／HOXB7）及对照细胞株（SW480／vector，293FT／Vector）。采用实时荧光定量PCR（qRT—PCR）和Westernblot法检测HOXB7mRNA和蛋白的表达，采用免疫荧光染色技术评估HOXB7对结直肠癌细胞株β—Catenin的调控作用，采用qRT—PCR和Westernblot法检测Wnt信号通路下游靶基因及蛋白的表达，采用小室试验评价各组细胞转移侵袭能力。结果SW480／HOXB7，293FT／HOXB7细胞株的HOXB7 mRNA和蛋白表达水平较SW480／vector，293FT／Vector细胞株显著提高（P均〈0．05）。HOXB7过表达后，细胞核中β-Catenin表达水平显著升高，并可见明显的入核现象，而在细胞浆中β-Catenin表达水平无明显变化。随着HOXB7的过表达，293FT、SW480细胞株中DKK1、cyclinD1、LEF1等Wnt信号通路下游基因及蛋白的表达均出现不同程度的上调现象。SW480／HOXB7细胞株穿过滤膜的细胞数显著高于SW480／vector细胞株（P〈0．05）。结论HOXB7介导Wnt／β-Catenin信号通路的激活能够通过调控下游基因，提高结直肠癌细胞侵袭能力，增加肿瘤转移的风险。
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