作者：陈凤; 艾琳; 陈家旭; 沈慧敏; 赵银娇; 刘...片形吸虫抗原westernblot
摘要：目的应用SDS-PAGE对肝片形吸虫和巨片形吸虫成虫蛋白组分进行比较分析,并Western blot检测其特异性蛋白分子。方法分别收集肝片形吸虫和巨片形吸虫成虫,冰上研磨匀浆,提取上清蛋白,采用SDS-PAGE分析肝片形吸虫和巨片形吸虫差异蛋白组分;应用Western blot检测特异蛋白组分。结果虫体蛋白经SDS-PAGE后采用Gel Doc XR+凝胶成像系统对电泳图像进行高灵敏度分析,巨片形吸虫和肝片形吸虫成虫均有37条带,低灵敏分析显示肝片形吸虫成虫蛋白主要7条带,巨片形吸虫成虫蛋白主要有6条带,相对分子质量集中在10×10^3~70×10^3。Western blot检测巨片形吸虫有6条反应带,分别在150×10^3、100×10^3、75×10^3、50×10^3、34×10^3、23×10^3等位置;肝片形吸虫5条反应带,分别在55×10^3、37×10^3、34×10^3、23×10^3、15×10^3等位置。与血吸虫、囊虫、广州管圆线虫、旋毛虫的交叉反应蛋白为75×10^3、100×10^3、75×10^3组分(巨片形吸虫)和60.34×10^3组分(肝片形吸虫)。结论肝片形吸虫成虫与巨片形吸虫成蛋白组成有差异不明显,抗原特异的蛋白在23×10^3、15×10^3等位置,且22×10^3~24×10^3组分占比较大(在在肝片形吸虫占48.4%,巨片形吸虫占77.3%)。其特异的蛋白酶类有待经质谱分析后用于诊断抗原及疫苗研究,而15×10^3组分可能是肝片形吸虫特有的可区别于巨片形吸虫的蛋白。
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