作者：康攀攀; 刘映雪; 郭甜甜; 张公安; 李东轩...大蒜素氧化低密度脂蛋白巨噬细胞细胞凋亡
摘要：目的：研究大蒜素对巨噬源性泡沫细胞凋亡和内质网应激（endoplasmic reticulum stress,ERS）凋亡通路关键分子半胱天冬酶-12（caspase-12）的影响,并探讨可能的分子机制。方法：体外培养RAW264.7巨噬细胞,分别给予大蒜素（12.5、25和50 mg/L）和4-苯丁酸（4-phenylbutyric acid,PBA;4 mmol/L）预处理1 h后,加入氧化低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL;100 mg/L）或衣霉素（tunicamycin,TM;4 mg/L）处理24 h。分别采用MTT法和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞活力和凋亡情况;采用相应的试剂盒测定细胞内caspase-3和培养液中乳酸脱氢酶（lactic dehydrogenase,LDH）的活性;采用Western blot技术检测caspase-12的表达变化;油红O染色检测细胞内脂质蓄积;酶比色法测定细胞内总胆固醇含量。结果：与ERS抑制剂PBA相似,大蒜素可减轻oxLDL所致的巨噬细胞损伤,表现为细胞活力增加、LDH漏出减少、细胞凋亡率和caspase-3活性降低（P〈0.05）;ERS诱导剂TM可导致巨噬细胞活力下降,LDH漏出增多及细胞凋亡率升高（P〈0.05）,大蒜素可明显阻断TM的上述作用;大蒜素明显抑制ox-LDL所致的caspase-12活化（P〈0.05）;与TM组相比,大蒜素也可显著抑制TM所诱导的caspase-12活化（P〈0.05）。另外,大蒜素还可显著抑制ox-LDL所诱导的巨噬细胞内脂质蓄积和泡沫细胞形成（P〈0.05）。结论：大蒜素可减少ox-LDL所致的巨噬源性泡沫细胞凋亡,其机制可能与抑制caspase-12活化有关。
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