作者:龙仙萍; 汪松; 赵然尊; 石蓓; 敖竹君降钙素基因相关肽骨髓间充质干细胞转染内皮分化血管生成
摘要:目的:研究慢病毒介导的降钙素基因相关肽(calcitoningene—relatedpeptide,CGRP)基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemceBs,MSCs)内皮分化功能的影响。方法:用密度梯度离心结合贴壁法培养大鼠骨髓MSCs,携带CGRP的慢病毒载体转染MSCs,未转染MSCs作为对照,应用ELISA法检测CGRP蛋白表达;实验分为转染Lenti—CGRP的MSCs(CGRP)组、转染Lenti-CGRP的MSCs+CGRP受体拮抗剂(CGaP8-37)组(CGRP+CGRP8-37,)及未经转染的对照组。应用免疫细胞化学检测细胞CD31和Ⅷ因子相关抗原的表达以鉴定其分化能力;细胞计数法观察转染CGRP后MSCs增殖的影响;Matrigel实验观察转染CGRP对MSCs形成管腔样结构能力的影响。结果:MSCs转染CGRP基因经诱导分化后的CD31和Ⅷ因子相关抗原阳性细胞数量增多,与对照组相比有显著差异(P〈0.05);转染CGRP组细胞数量增长较快,与对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05);Matri-gel实验显示转染CGRP组细胞微血管新生明显,与对照组相比差异有统计学意义(P〈0.05)。而CGRP+CGRP8-37组上述作用明显被抑制。结论:转染CGRP基因能促进MSCs向内皮分化,并能促进内皮细胞增殖,在一定的条件下,可促进微血管新生。
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