作者：韩莉; 杨钦河; 杨雪松; 胡巢凤; 张玉佩; ...非酒精性脂肪性肝炎疏肝健脾方药kupffer细胞
摘要：目的：探讨疏肝健脾方药对非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠Kupffer细胞核因子κB（NF-κB）p65和IκB激酶β（IKKβ）mRNA及蛋白表达的影响。方法：采用高脂饲料喂养复制大鼠NASH模型,在施以造模因素的同时分别灌服疏肝方（柴胡疏肝散）、健脾方（参苓白术散）和综合方（柴胡疏肝散和参苓白术散的合方）的高、低剂量进行干预,16周后分离Kupffer细胞,Typan blue染色和流式细胞术（FCM）分别对Kupffer细胞进行活性和纯度鉴定;实时定量PCR法检测Kupffer细胞IKKβ和NF-κB p65 mRNA的表达水平;Western blotting法检测Kupffer细胞IKKβ、p-IKKβ和NF-κB p65蛋白水平。结果：每只大鼠获得纯化的Kupffer细胞（1.5～2.0）×107,Typan blue染色显示这些细胞活力均在95%以上,FCM检测纯度均在90%以上;与正常组比较,模型组Kupffer细胞IKKβmR-NA及蛋白的表达水平均明显升高（P〈0 01）;与模型组比较,高剂量综合方、健脾方和疏肝方组IKKβmRNA的表达水平下调明显（P〈0.01或P〈0.05）;IKKβ及磷酸化蛋白的表达水平以高剂量健脾方组下降最为显著（P〈0.01或P〈0.05）;与正常组比较,模型组Kupffer细胞NF-κB p65 mRNA及蛋白的表达水平均明显升高（P〈0.01）,与模型组比较,NF-κB p65 mRNA的表达水平以综合方组及高剂量健脾方组下调明显（P〈0.05）,NF-κBp65蛋白的表达水平以高剂量健脾方组下降最为显著（P〈0.01）。结论：Kupffer细胞IKKβ、NF-κB p65 mRNA及IKKβ、p-IKKβ、NF-κB p65蛋白的高表达可能参与NASH的发病,抑制这些信号分子的表达可能是疏肝健脾方药抗NASH的重要机制之一。
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