作者：闫凤霞; 钱涛; 高维娟; 叶冬青; 任立群; ...海马神经元黄芪注射液细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3钙调蛋白
摘要：目的：观察黄芪注射液对缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元钙调蛋白（CaM）表达的影响,探讨黄芪注射液抑制缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元凋亡的机制。方法：取原代培养8 d的大鼠海马神经元,随机分为4组：正常对照组、缺氧缺糖/复氧复糖组、黄芪注射液溶剂对照组和黄芪注射液组。除正常对照组外均进行缺氧缺糖0.5 h再复氧复糖。各组于复氧复糖后0 h、0.5 h、2 h、6 h、24 h、48 h、72 h和120 h采用免疫组织化学染色法检测caspase-3的表达,采用Western blotting和RT-PCR方法检测CaM的表达。结果：与正常对照组相比,除0 h和0.5 h之外,缺氧缺糖/复氧复糖组各时点海马caspase-3蛋白阳性神经元数目、占神经元总数的百分率及平均吸光度值均明显增多（P〈0.05）,于24 h达到高峰。黄芪注射液组除0 h和0.5 h之外,各时点以上指标比缺氧缺糖/复氧复糖组显著减少（P〈0.05）。黄芪注射液溶剂对照组以上指标与缺氧缺糖/复氧复糖组无差异（P〉0.05）。各时点缺氧缺糖/复氧复糖组海马神经元CaM蛋白表达均较正常对照组明显升高（P〈0.05）;与缺氧缺糖/复氧复糖组相比,黄芪注射液溶剂对照组各时点CaM蛋白表达无明显变化（P〉0.05）,而黄芪注射液组在各个时点CaM蛋白表达明显降低（P〈0.05）。各时点缺氧缺糖/复氧复糖组海马神经元CaM mRNA表达均较正常对照组明显降低（P〈0.05）;与缺氧缺糖/复氧复糖组相比,黄芪注射液溶剂对照组各时点CaM mRNA表达无明显变化（P〉0.05）,而黄芪注射液组在各个时点CaM mRNA表达明显升高（P〈0.05）。结论：黄芪注射液抑制CaM表达,可能是其减轻缺氧缺糖/复氧复糖大鼠海马神经元凋亡的机制之一。
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