作者：孙智睿; 王艳丽; 杜丽娟; 赵雅君; 王丽娜...缺氧受体钙敏感内质网应激半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12心肌细胞
摘要：目的：观察钙敏感受体表达增加诱发内质网应激在缺氧复氧性心肌损伤中的作用。方法：乳鼠原代心肌细胞培养4—5d后，随机分为5组：正常对照组（N组）、缺氧／复氧组（H／Re组）、阻断剂（NiCl2，CdCl2）组、激动剂（GdCl3，NiCl2，CdCl2）组和caffeine组。采用饱和氮气pH6．8的D—Hands液培养细胞3h，再用含20％新生牛血清的DMEM液培养细胞9h，复制心肌缺氧／复氧模型。检测血清LDH活力，MTY检测细胞存活率，心肌细胞caspase一12和CaSR蛋白表达水平Westernblotting检测，激光扫描共聚焦显微镜（LSCM）测定心肌细胞内游离钙的变化。结果：缺彰复氧组和激动剂组LDH活力、细胞内游离钙浓度均高于对照组；同时，caspase-12和CaSR的表达也明显高于对照组。反之，细胞存活率低于对照组。结论：心肌缺氧／复氧过程中，钙敏感受体表达增多，从而破坏了细胞内钙稳态诱发过度的内质网应激，通过caspase-12等凋亡蛋白表达的增多等途径引起心肌细胞凋亡。
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