作者：张滨; 钱睿哲; 陆超; 赵凤娣; 殷莲华类胰蛋白酶蛋白激酶b转录因子白细胞介素8
摘要：目的:探讨蛋白激酶B(PKB)在类胰蛋白酶(tryptase)诱导基因表达中的作用.方法:采用RT-PCR 和Western blotting方法,检测tryptase对ECV304细胞PKB(Akt)的表达及其活性和对转录因子AP-1、NF-κB p65亚单位、JBK、P38MAPK、趋化因子IL-8表达的影响.结果:在ECV304中1 μg/Ltryptase可使PKB蛋白质磷酸化水平增加并促进PKB、转录因子NF-κB P65亚单位、AP-1和趋化因子IL-8的表达,但对JNK、P38MAPK表达影响不大.PI3K特异性抑制剂LY294002可抑制PKB的表达增加,同时可抑制NF-κBP65亚单位和IL-8的表达增加;反义PKB质粒瞬时转染ECV304,可抑制PKB、AP1、NF-κB P65亚单位和IL-8的表达增加;PAR2的抗体可抑制PKB的磷酸化,但不能阻断PKB表达.结论:在ECV304细胞tryptase经其膜受体PAR2通过PI3K促进PKB的磷酸化而激活之,通过其下游途径促进趋化因子IL-8、转录因子AP-1、NF-κB P65亚单位和PKB本身的表达增加.
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