作者：江从庆; 樊利芳; 刁路明; 钱群; 夏东; 王...sw480细胞一氧化氮缺氧缺氧诱导因子一氧化氮合酶内皮细胞生长因子
摘要：目的:观察一氧化氮(NO)对低氧培养的人结肠腺癌细胞株SW480中缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响.方法:运用免疫细胞化学检测HIF-1α、VEGF、iNOS蛋白表达,Western blot检测HIF-1α蛋白表达.原位杂交法检测HIF-1α mRNA表达.结果:免疫细胞化学染色图像分析结果显示:低氧组细胞HIF-1α、VEGF和iNOS蛋白表达水平显著高于常氧组(P＜0.01,P＜0.01,P＜0.05)和低氧+genistein(三羟基异黄酮)组(P＜0.01,P＜0.05,P＜0.05).低氧条件下,SNP(硝普钠)显著抑制HIF-1α、VEGF蛋白的表达,但对iNOS表达无明显影响;NOC5(NO发生剂)诱导HIF-1α、VEGF、iNOS蛋白的表达;NO抑制剂L-NAME(N-硝基精氨酸甲酯)则抑制3者的表达.Western blot结果显示:低氧培养条件下,HIF-1α呈强表达,给予genistein能显著抑制其表达;而给予SNP和L-NAME后,蛋白表达量减少,给予NOC5,则蛋白表达增强.原位杂交结果显示:常氧组、低氧组及低氧+genistein组、低氧+SNP组、低氧+NOC5组、低氧+L-NAME组HIF-1α mR-NA表达A值组间均无显著差异.结论:低氧诱导SW480细胞HIF-1α蛋白表达量增高,从而上调VEGF和iNOS表达.低氧条件下,NO供体SNP抑制SW480细胞HIF-1α蛋白及VEGF表达,而另一种供体NOC5则促进HIF-1α表达,两种供体对HIF-1表达的影响可能存在不同的机制.
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