作者：侯卫红; 袁保梅; 王天云; 柴玉荣; 侯桂琴...canstafincdna克隆血管生成抑制剂原核表达
摘要：目的:从小鼠肝脏组织克隆canstatin cDNA并在大肠杆菌(E.coli)中表达,为进一步研究其抗肿瘤血管生成活性奠定基础.方法:用Trizol试剂提取小鼠肝脏组织总RNA,通过RT-PCR扩增小鼠canstatin(m canstatin)的cDNA,克隆到pMD18-T载体中并进行序列分析.将小鼠canstatin cDNA定向克隆于原核表达载体pET30a(+)中,在大肠杆菌E.coli BL21中经IPTG诱导表达.结果:小鼠canstatin的cDNA长度为684bp,编码227个氨基酸,与已知的人canstatin的cDNA同源性为89%,氨基酸的同源性为96%.IPTG诱导原核表达载体pET30a(+)/m canstatin在大肠杆菌E.coli B121中表达.结论:首次成功克隆了小鼠canstatin的cDNA,其原核表达载体pET30a(+)/m canstatin在大肠杆菌E.coli BL21中高效表达,小鼠canstatin抗肿瘤血管生成活性有待进一步研究.
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