作者：宋国华; 刘田福rapd中国地鼠分析体系优化基因组dnabuffer反应体系模板dna分析比较taq酶循环参数预变性引物温度延伸
摘要：目的优化中国地鼠RAPD分析体系.方法以30条引物对山医群体中国地鼠的两个家系基因组DNA在各种不同条件下进行RAPD,分析比较扩增结果.结果在下列反应体系及温度循环参数下结果较好:在25μl的反应体系中含有10×buffer 2.5μl,dNTP 0.2 mmol/L,Mg2+2.0 mmol/L,引物0.2 μmol/L,Taq酶1.5 U,模板DNA 15ng,扩增程序为94℃预变性3 min后进入循环体系,94℃变性30 s,36℃退火50 s,72℃延伸1 min,40个循环后接7 min延伸.结论以上述反应体系及温度循环参数进行中国地鼠RAPD,扩增结果稳定.
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