作者：Guo-hui CHANG Andrew Dividson Lei LIN ...核衣壳蛋白基因sars病毒真核细胞表达基因表达诱导控制细胞系sars冠状病毒cdna克隆
摘要：为了为 SARS-CoV nucleocapsid 基因 expression.The recombinant 的可诱导的控制建立真核细胞的房间线， pTRE-Tight-SARS-N 的 plasmid 被把 plasmid p8S 用作包含盖住 SARS-CoV HKU-39449 的 nucleocapsid 基因的 cDNA 克隆的 PCR 模板构造。限制酶消化和顺序分析显示 pTRE-Tight-SARS-N 的 recombinant plasmid 与将改进翻译效率的优化核苷酸顺序包含了 nucleocapsid 基因。积极房间克隆被 cotransfecting pTRE-Tight-SARS-N 面对 puromycin 与线性标记 pPUR 选择到 BHK-21 在 Tet 上房间。有 SARS-CoV neucleocapsid 基因表示的可诱导的控制的真核细胞的房间排队的一套双马厩(BHK-Tet-SARS-N ) 被使用 SDS 页和西方污点的分析识别。SARS-CoV nucleocapsid 蛋白质的表示被 doxcycline 的变化集中紧在构造双马厩房间线调整。构造 BHK-Tet-SARS-N 房间紧张将在 vitro 和 SARS-CoV 的进一步反向的基因研究便于 SARS-CoV 的营救。
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