作者：钟敏 沈莉菁 陈芳源 张勇 匡颖 钟华 钟济...斑马鱼mycn基因造血调控因子
摘要：目的：通过热激活启动子条件性过表达鼠源性MYCN基因,建立生殖系稳定转染的斑马鱼系,以研究MYCN基因对造血调控因子转录的影响。方法：构建携绿色荧光蛋白＂报告基因＂的MYCN质粒,显微注射到斑马鱼胚胎单细胞期,通过荧光筛选出F0代,继而建立生殖系稳定转染的转基因鱼系。通过反转录聚合酶链反应（RT-PCR）、实时荧光定量PCR（real-time fluorogentic quantitative PCR,RFQ-PCR）及血涂片论证MYCN基因的过表达及其对造血调控因子的影响。结果：在256条嵌合表达的性成熟F0代斑马鱼中,鉴定发现有18条（7.0%）显示转基因阳性,其中雄鱼8条,雌鱼10条。同时,RFQ-PCR及外周血涂片均显示,转基因斑马鱼F1和F2代均发生明显的造血分化障碍,造血关键调控因子scl、mpo、gata1基因表达量明显下降。结论：斑马鱼在基因研究中具有直观及规模化优势,特别适用于单一基因的研究,MYCN基因产物可显著抑制红系生成和造血分化。
注：因版权方要求，不能公开全文，如需全文，请咨询杂志社
