作者：戴美学; 张成刚苜蓿根瘤菌乙酰辅酶a合成酶过量表达纯化
摘要：PCR扩增了苜蓿根瘤菌乙酰辅酶A合成酶编码基因（acsA1)，克隆到连接-非依赖型载体pET30 LIC；在E．coli BL21(DE3)pLysS中得到了有效表达，表达需IPTG的诱导，诱导3h达到酶活高峰．采用His·Bind柱层析对ACS进行了纯化，纯化的酶蛋白经SDS-PAGE呈单一浓带，分子量约72000，具较高的酶活，是无细胞提取液的12．7倍．酶动力学分析显示，Vmax、Km分别为(413．6±11．7)mmol L^-1和(5．8±0．6)mmol L^-1．图4表2参8
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