作者：朱元娣; 孙凌霞; 李春雨; 张文; 王涛苹果柱型苹果柱型基因差异表达分析
摘要：以苹果（Malus×domestica Borkh．）柱型品种舞姿、非柱型品种富士及其杂交F1群体中柱型、非柱型单株为研究试材，应用cDNA—AFLP（cDNA—amplified fragment length polymorphism）技术，研究柱型与非柱型苹果cDNA的差异表达，探讨了苹果柱型基因Co表达的分子机制。通过64对引物组合的cDNA-AFLP分析获得了1630条在柱型与非柱型苹果中差异表达的片段。经过BSA（bulked segregant analysis）分析和反向Northern杂交鉴定，获得了11个差异表达的cDN段，并进行了克隆、测序和序列同源性检索分析。有5个片段在GenBank数据库中发现同源序列，其余的6个功能未知。核酸和氨基酸比对分析中同源性最高的是片段A7和A16。A7的核苷酸序列同源于红叶石楠Photinia fraseri 26S核糖体RNA（97％）、蛋白同源于玉米的细胞色素P450单加氧酶（91％），A16的核苷酸（85％）及蛋白（93％）同源于直果草属Triphysaria versicolor的α—expansin 2基因。对A7、A16两个候选基因片段再进行正向Northern杂交验证，在富士中表达最强，在非柱型后代、柱型后代及舞姿中表达依次减弱。由此推断，由细胞色素P450单加氧酶基因所调控的赤霉素GAs变化影响了苹果柱型性状的表达。
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