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马铃薯S病毒外壳蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者:李广存; 杨煜; 王秀丽; 杨元军; 毕玉平马铃薯马铃薯s病毒外壳蛋白基因序列分析westem印迹抗血清制备

摘要:以田间采集的马铃薯病叶中提取的马铃薯病毒S(PVS)总RNA为模板,通过RT-PCR获取长度为890bp的PVS-cp的cDNA,克隆至pGEM-T载体上.酶切回收该基因片段,并构建了该基因的原核表达质粒pBV-pvs.SDS-PAGE凝胶电泳和Western 印迹分析表明:VS-cp基因在大肠杆菌JM109中可特异地高效表达分子量约33kD的蛋白,且表达蛋白具有良好的抗原活性.利用该表达产物免疫动物家兔,获得的抗血清可用于大田马铃薯S病毒的快速检测.

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