作者：张宏叶; 于兴达; 王佩佩; 贾秀琪; 李欣茹...河川沙塘鳢基因克隆mrna表达量
摘要：本研究采用cDNA末端快速扩增（RACE）和实时荧光定量PCR等技术，对河川沙塘鳢（Odontobutispotamophilal的Mn—SOD基因进行了克隆和表达模式分析。结果显示，克隆得到的河川沙塘鳢Mn—SOD基因的cDNA序列全长为1008bp，包括678bp的开放阅读框（0RF），15bp的5＇UTR区和315bp的3＇UTR区，并且具有脊椎动物典型的加尾信号AATAAA和31bp的PolyA尾巴，推测该序列共编码225个氨基酸。该基因包含SodFeN（z8．109）与SodFeC（116—219）2个保守的结构域，此结构与其他物种极为相似，表明该基因在物种进化中比较保守。与已知物种Mn—SOD进行同源性比对发现，河川沙塘鳢Mn，SOD氨基酸序列与条石鲷（Oplegnathusfasciatus）和线鳢（Channastriata）相似性最高，均为90．3％。采用qRT-PCR技术检测了Mn—SOD基因在河川沙塘鳢8个组织（肾、肝、肌肉、脑、脾、鳃、眼、心脏）和8个发育时期（受精卵期、桑椹胚期、原肠胚期、神经胚期、体节期、口裂期、出膜后1d、出膜后3d）的表达情况。在检测的8个组织中都有Mn—SOD基因的表达，肌肉中的表达量最高；胚胎到仔鱼的8个发育时期都有Mn—SOD基因的表达，桑椹胚期表达量最高。在急性NaN02胁迫处理后，河川沙塘鳢肝组织Mn—SOD基因的mRNA表达呈先升高后降低的趋势。而鳃组织Mn—SOD基因的mRNA表达呈先降低后升高再降低的趋势。研究表明，Mn—SOD很可能在对抗NaN02胁迫引起的氧化损伤中起重要作用，这将为控制河川沙塘鳢的人工育苗及养殖条件提供有价值的参考资料。
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