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水产品中磺胺二甲嘧啶间接竞争ELISA检测法的建立

作者:英瑜; 李健cielisa残留检测

摘要:将磺胺二甲嘧啶(Sulfamethazine,SM2)与牛血清白蛋白(BSA)、人血清白蛋白(HSA)偶联,分别作为免疫原及包被原,建立了水产品中磺胺二甲嘧啶间接竞争ELISA检测方法.实验结果表明,理想的磺胺二甲嘧啶人血清白蛋白(SM2-HSA)包被抗原浓度为1mg/L,酶标二抗(羊抗兔IgG-HRP)工作浓度为1/1 000,多抗(SM2-PcAb)工作浓度为1/3 200,最适检测范围为10~200μg/L,最低检测限为1.89μg/L,本实验所建立间接竞争ELISA检测方法的孔间差异为2.56%,板间差异为5.14%,实验重复性好.在实验浓度范围内,磺胺二甲嘧啶(Sulfamethazine)的抗血清与磺胺嘧啶(Sulfadiazine)、磺胺甲噁唑(Sulfamethoxazole)、氯霉素(Chloramphenicol)、恩诺沙星(Enrofloxacin)、甲氧苄啶(Trimethoprim)、呋喃唑酮(Furazolidone)等可能会因同时使用而导致共同残留的抗菌药物未显示免疫交叉反应性,与结构相近的磺胺类药物磺胺嘧啶的交叉反应性为11.0%.所建立的方法有较高特异性和灵敏度,适合磺胺二甲嘧啶的快速筛选.整个测定时间为5~6h.

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渔业科学进展

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