作者：孙霞; 张静; 印锦; 秦笙; 张国政; 李木旺雏翅蛋白酶体基因组编辑家蚕
摘要：【目的】 研究分析编码蛋白酶体调控复合物亚基基因BmRpt4(Regulatory particle triple-A ATPase4,BGIBMGA010794)在家蚕翅膀发育过程中的功能。【方法】 利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术,将BmRpt4的gRNAs和Cas9 mRNA直接注射到家蚕胚胎中,观察G0代家蚕个体雏翅率,并分析雏翅个体中BmRpt4基因突变情况。【结果】 经统计,对照组G0代家蚕个体均表现为正常翅,而实验组注射BmRpt4的gRNAs和Cas9 mRNA后,G0代约66.7%家蚕个体表现出小翅表型。在分子水平上对小翅表型个体进行检测,发现BmRpt4基因在两个gRNA及其之间位置均有不同长度片段的缺失或者插入,说明在这些突变个体中BmRpt4基因被不同程度的敲除,从而其功能缺失,导致出现小翅表型。【结论】 该研究结果表明编码蛋白酶体调控亚基的BmRpt4基因在家蚕翅膀发育中具有重要作用,为蛋白酶体在生物组织器官发育中调控作用研究提供重要实验依据。
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