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基于次血红素六肽的过氧化氢和葡萄糖灵敏比色方法

作者:石鑫; 刘传志; 宫平; 李伟; 侯玥过氧化氢次血红素六肽模拟酶比色分析

摘要:采用次血红素六肽(DhHP-6)催化H2O2氧化4-氨基安替吡啉-氯代苯酚显色体系,建立了测定H2O2和葡萄糖的方法。研究了pH值、底物浓度和DhHP-6浓度对实验的影响,检测了比色方法的反应线性、稳定性、相关性和回收率。在最佳反应条件下,DhHP-6在不同时间及温度条件下,活性要优于过氧化物酶(POD);DhHP-6催化H2O2的米氏常数(Km)和最大反应速率(vmax)分别为0.171mmo/L和4.22×10^-6mol/s;H2O2响应的线性范围为0.39~25.0mmol/L;高、中、低3水平测定的变异系数(CV)和加标回收率分别在1.29%~2.16%和94.5%~101.1%之间;与葡萄糖商品试剂盒比较相关系数R^2=0.9946;36例血液样品中的葡萄糖浓度在4.26~17.48mmol/L之间。与葡萄糖检测商品试剂盒之间的两组数据经统计差异不显著(P>0.05)。该方法是一种简单、廉价、方便、灵敏的比色测定方法。

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应用化学

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