作者:石苏英; 金科涛; 王宇光; 高月白蔹乌头细胞色素p450酶活性蛋白质免疫印迹
摘要:目的研究乌头、白蔹配伍对主要药物代谢酶CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1/2在酶活性、mRNA水平和蛋白质水平的影响。方法采用高效液相色谱法测定CYP1A2、CYP2E1活性;采用紫外-可见分光光度法测定CYP3A1/2活性;分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western Blot方法评价药物对CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1、CYP3A2 mRNA及蛋白水平的影响。结果乌头、白蔹配伍后CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1/2的酶活性均有下降;Western Blot检测显示CYP1A2、CYP3A1的蛋白质表达水平上升;CYP2E1、CYP3A2的蛋白质表达水平下降。RT-PCR检测显示CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1、CYP3A2的mRNA水平均上升。结论乌头、白蔹配伍后抑制CYP1A2、CYP2E1、CYP3A1/2的酶活性,CYP2E1酶活性下降可能主要通过影响基因转录进而影响其蛋白水平来实现;CYP1A2、CYP3A1/2酶活性下降则与基因和蛋白水平不相关。
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