作者:任利君; 弥曼; 宁养红谷氨酸脱氢酶过氧亚硝酸酪氨酸硝基化修饰别构调节
摘要:目的:观察过氧亚硝基阴离子(ONOO-)对谷氨酸脱氢酶(GDH)的硝基化修饰及功能调控.方法:GDH与ONOO-体外反应,测定酶活性及别构调节效应,Western Blot检测GDH硝基化修饰;制备含"去硝基化酶"的脾脏蛋白,观察能否逆转ONOO-作用.结果:4-12μmol/L ONOO-不影响GDH活性和二磷酸腺苷(ADP)别构激活作用,但使三磷酸鸟苷(GTP,10μmol/L)别构抑制作用由(49±4)%降低至(69±7)%和(75±3)%;36-108μmol/L ONOO-使GDH活性由(0.81±0.05)kat/kg降低至(0.55±0.06)和(0.29±0.07)kat/kg,使GTP(10μmol/L)别构抑制作用降低至(83±4)%和(95±7)%;324μmol/L ONOO-使GDH完全失活.Western Blot检测到ONOO-使GDH发生硝基化修饰.脾脏蛋白可部分逆转上述作用.结论:ONOO-可通过硝基化修饰调控GDH催化功能.
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