作者：姜习新; 张鹏辉; 涂植光; 杨毅; 刘靳波端粒酶逆转录酶启动子sirna表达载体靶向性
摘要：目的：体外研究siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6＋1表达载体在肿瘤细胞中的靶向性.方法：常规培养稳定表达绿色荧光蛋白的肝癌SMMC-7721细胞株（EGFP-7721）和稳定表达绿色荧光蛋白的人正常成纤维细胞株HELF（EGFP-HELF）.以PTZU6＋1质粒转染EGFP-7721细胞和EGFP-HELF细胞为空白质粒组,siRNA-EGFP-PTZU6＋1质粒转染EGFP-7721细胞和EGFP-HELF细胞为实验对照组,将siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6＋1质粒转染EGFP-7721细胞和EG-FP-HELF细胞作为实验组,用real-time SYBR Green PCR和Western Blot鉴定siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6＋1对两种细胞株的绿色荧光蛋白表达的影响.结果：正向和反向的重组质粒siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6＋1转染EGFP-HELF细胞与空白质粒比较,EGFP基因表达无差异（P〉0.05）,而转染稳定表达绿色荧光蛋白的7721后仅反向的siRNA-EG-FP-hTERT/U6-PTZU6＋1重组质粒抑制EGFP基因的表达（P〈0.01）.siRNA-EGFP-PTZU6＋1质粒与空白质粒组比较,在EGFP-7721和EGFP-HELF细胞株间,EGFP基因的表达均具有统计学差异（P〈0.01）.结论：反向插入的siRNA-EGFP-hTERT/U6-PTZU6＋1重组质粒在肿瘤细胞具有一定靶向性,为进一步探讨基因的靶向治疗奠定了基础.
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