作者：李美山; 张成; 陈松林; 于美娟; 张雅妮; ...基质干细胞腺病毒c2c12myodmyogenin绿色荧光蛋白成肌调节因子
摘要：目的：研究重组腺病毒（Ad）对骨髓基质干细胞（MSCs）的转染，以及绿色荧光蛋白（GFP）和成肌调节因子MyoD和Myogenin在MSCs中的表达．方法：用差速贴壁法体外培养大鼠MSCs，并用流式细胞仪（FCM）检测其表面标志；对构建有绿色荧光蛋白的重组腺病毒（Ad-GFP）进行扩增和鉴定，并转染MSCs；用RT—PCR检测MyoD和Myogenin在转染后MSCs中的表达；将MSCs与C2C12成肌细胞共培养，诱导前者的分化，并用免疫荧光检测MyoD的表达．结果：FCM检测证实，在MSCs的表面标志中CD11b和CIM5阴性，而CD29和CD44阳性；随着Ad-GFP感染复数（MOI）的增加，转染效率也相应提高，但在MOI大于100后，MSCs开始出现病变；RT—PCR结果提示MyoD和Myogenin在转染后的MSCs中有表达；免疫荧光检测证实诱导后的MSCs可以表达MyoD蛋白．结论：MSCs可以被Ad-GFP有效转染而表达GFP；同时内源性成肌调节因子的激活，可以促进MSCs的成肌分化．
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