作者:姜昌丽; 张英起; 颜真
摘要:目的:构建人转化生长因子β1(TGF-β)基因的原核表达载体,表达并纯化GST-hTGFβ1.方法:应用RT-PCR获得人TGF-β的基因片段,成功构建人TGF-β原核表达载体,诱导表达人TGF-β与GST的融合蛋白;应用亲和层析法纯化重组融合蛋白,对纯化产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western Blot检测分析.结果:成功构建了人TGF-β重组融合表达质粒pGEX-4T-1-TGF-β,表达的蛋白经SDS-PAGE电泳分析,在Mr约为39×10^3处出现了一条新生的蛋白条带,该表达蛋白具有与TGF-β1抗体特异性的结合能力.结论:成功构建了人TGF-β基因的原核表达载体并纯化了该基因的原核表达产物,为下一步的人TGF-β自体疫苗的研制奠定了基础.
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