作者：周唏; 张鹏辉rna干扰肝肿瘤端粒末端转移酶
摘要：目的: 利用RNA干扰稳定筛选-抑制技术,抑制人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达,探讨靶向hTERT基因RNAi与抑制肝癌细胞增殖的时-效关系. 方法: 设计靶向hTERT基因的小干扰RNA,构建重组表达质粒pGenesil-shRNA-hTERT并导入肝癌SMMC-7721细胞株,经G418筛选,建立稳定表达siRNA-hTERT的细胞株. 采用real-time RT-PCR、MTT和PCR-TRAP法同时检测pGenesil-shRNA-hTERT稳定抑制组和未处理SMMC-7721细胞组hTERT基因表达、端粒酶活性及细胞增殖变化. 结果: 在稳定表达pGenesil-shRNA-hTERT的SMMC-7721细胞株中,RNAi效力持续、稳定存在,hTERT mRNA表达、端粒酶活性明显降低,瘤细胞增殖被抑制. 结论: RNA干扰能持续、稳定地抑制靶基因hTERT mRNA表达及肿瘤细胞增殖,是有潜力的基因治疗肿瘤新方法.
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