作者：郭晓彤; 张积仁; 刘文超; 任军; 李立文癌症疫苗端粒酶逆转录酶肿瘤免疫疗法
摘要：目的：设计hTERT 1540-PTD融合基因表达框并构建携带该表达框的穿梭质粒。方法：根据hTERT 1540表位、HIV-1 TAT-PTD和PTIM的氨基酸序列设计融合疫苗，然后根据哺乳动物偏爱密码子反翻译成基因序列，分段合成寡聚脱氧核糖核酸，磷酸化、退火后先后克隆至pSP72的BamHI-EcoRI和XbaI-BanHI之间，将经双酶切鉴定获得的阳性重组子进行基因测序，然后将hTERT 1540-PTD融合基因表达框亚克隆至pDC315。结果：测序结果表明hTERT 1540-PTD和hTERT 1540-PTD融合表达框的基因序列与设计完全一致，穿梭质粒pDC315-1540-PTD和pDC315-1540-PTD4经EcoRI酶切后均清晰可见112bp电泳条带，与预测相符。结论：成功获得了携带hTERT 1540-PTD和hTERT 1540-PTIM表达框的穿梭质粒pDC315-1540-PTD和pDC315-1540-PTD4，为制备以重组腺病毒为载体的1540-PTD基因疫苗、比较蛋白转导能力的强弱对基因疫苗免疫效能的影响奠定了基础。
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