作者:秦云; 陈苏民; 关路媛; 陈南春; 张立藩bmp成熟肽人骨形成蛋白克隆大肠杆菌诱导表达dna表达载体高效表达
摘要:目的:克隆编码人骨形成蛋白4(hBMP4)成熟肽的cDNA基因,并在大肠杆菌中表达. 方法:从人胎盘组织中提取总RNA,以其为模板,采用RT-PCR方法得到编码hBMP4的成熟肽段(hBMP4m) cDNA,克隆入表达载体pDH2中,转化大肠杆菌DH5α,温度诱导表达. 结果:获得hBMP4m cDNA基因,成功克隆入温度诱导表达载体pDH2,DNA序列分析证实所插入的hBMP4m cDNA序列与设计预期一致;将获得重组表达质粒pDH2-hBMP4m转化大肠杆菌DH5α中,经温度诱导,目的蛋白占细菌总蛋白的41.5%. 结论:采用分子克隆的方法得到编码hBMP4成熟肽段的cDNA,克隆入表达载体,在大肠杆菌中成功获得hBMP4成熟肽的高效表达.
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