作者:严宏; 王建伟; 范建国分子伴侣糖基化白内障
摘要:目的:探讨糖基化对α-晶状体蛋白的修饰.方法:分离牛αL和βL-晶状体蛋白.分别与100 mmol/L 6-磷酸果糖(F6P)和核糖孵育0~25 d,于0,15和25 d监测200~600 nm波长范围的吸光度(A)值,色氨酸和非色氨酸荧光值,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析蛋白质交联物.测定αL-晶状体蛋白对加热诱导βL-晶状体蛋白凝聚的保护作为分子伴侣活性.结果:F6P和核糖对αL-晶状体蛋白的修饰,主要表现为时间依赖性的色氨酸荧光强度降低,非色氨酸荧光强度增强,交联物形成,分子伴侣活性降低,F6P较核糖的修饰作用显著.孵育4 d,F6P组伴侣活性下降约24% (P<0.01),15 d,伴侣活性几乎殆尽,而核糖组伴侣活性下降约60% (P<0.01).结论:糖基化可导致α-晶状体蛋白色氨酸残基内环境的构象改变,形成交联物,降低其分子伴侣活性.
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