作者:王树森; 胡蕴玉; 罗卓荆; 刘慧玲; 梁伟; ...硫酸肝素胶原神经组织工程生物材料三维结构雪旺细胞
摘要:目的:探讨以硫酸肝素复合胶原蛋白结合特定条件下冷冻干燥技术制备组成成分和内部空间结构均仿生神经的新型神经组织工程支架材料的可行性. 方法:胶原蛋白、硫酸肝素均溶于0.05 mol/L的乙酸中,搅拌成凝胶状,注入硅胶管模具,在20 μm/s 速度下浸入-180℃液氮中,冷凝成冰晶圆柱体,冷冻干燥,以紫外线照射的方法使其交联. 经扫描电镜观察、比较其与周围神经和脊髓的内部空间结构的异同,计算机图像分析方法测量微孔直径. 将Honchst荧光标记的雪旺细胞种植于硫酸肝素-胶原支架材料并移植于大鼠坐骨神经,在荧光显微镜、扫描电镜及光镜下观察其在材料内部的空间排列形式. 结果:以硫酸肝素复合胶原蛋白结合冷冻干燥技术制备的支架材料具有纵行的、平行排列的微管结构,高度仿生神经的内部空间三维结构,其微管直径为180 μm,孔隙率可达91%. 雪旺细胞在支架材料微管内呈线性平行排列,类似于神经基底膜与雪旺细胞形成的Bunger带. 结论:以硫酸肝素复合胶原蛋白结合特定条件下冷冻干燥技术,可以制备在组分和内部空间结构上高度仿生神经的新型神经组织工程支架材料,极具应用优势.
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