作者:张竹君; 李淑慧; 陈安; 胡川闽ibpreatimepcr
摘要:目的建立一种定量检测IBP表达水平的方法,为研究IBP在免疫细胞分化以及在免疫性疾病当中的作用奠定基础。方法利用反转录PCR和PCR技术获得目的基因和内参基因片段,构建重组质粒,以重组质粒为标准品,建立实时PCR标准曲线;测定外周血白细胞IBP和B—actin表达水平。以β—actin为内参照,均一化检测结果。结果重组质粒的阳性克隆经PCR扩增,0.8%琼脂糖凝胶电泳鉴定,目的基因片段插入载体内;建立起实时PCR标准曲线。检测20例正常人全血标本,得到比较稳定的检测结果。结论成功建立了用实时PCR定量检测IBP mRNA表达水平方法,为进一步研究IBP奠定了基础。
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