抗人免疫球蛋白G多克隆荧光抗体的制备及在肾活检中的应用

作者：段春光; 刘彦仿; 杨守京; 王彩云; 余璐人免疫球蛋白g多克隆抗体荧光抗体病理诊断

摘要：目的:制备抗人免疫球蛋白G(IgG)多克隆荧光抗体,并用于肾病的病理诊断. 方法:以免疫新西兰兔制备多克隆抗体, 用亲和层析的方法纯化抗体,并用ELISA法双向琼脂扩散,Westen-blot和免疫组化等方法对多克隆抗体进行测定.纯化的抗体标记荧光素,用免疫组化的方法鉴定并用于临床肾病的辅助诊断. 结果:获得的抗体琼脂双扩滴度为1∶32.ELISA法测定效价为1∶128000,Westen-blot 证实抗体特异性识别人IgG.纯化后抗体效价仍有1∶56000 ,灰度分析证实纯化后的抗体纯度达80%.间接法免疫组化检测抗体滴度为1∶800.标记荧光后效价无明显下降,免疫组化鉴定在临床病例中该荧光抗体能特异性识别人IgG. 结论:得到纯化后的抗人IgG抗体有良好的特异性和亲和性,抗体的结合力较高,标记荧光后得到的多克隆荧光抗体对具有IgG阳性的肾组织反应特异性强, 与商品化的抗人IgG抗体比较,效价及特异性均无显著差异,可用于肾病的临床诊断.

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