作者：聂盛丹 李灼日 曹友德 石泳中 吕品降钙素基因相关肽
摘要：【目的】探讨降钙素基因相关肽（CGRP）预培养对冻存肝细胞的保护作用与机制。【方法】外科切除肝组织分成5组：①对照组（DMEM预培养0h）；②标准预培养组（DMEM预培养8h）；③CGRP三个浓度预培养组（10^-6mol／L，10^-7mol／L，10^-8mol／L；8h）。采用胶原酶灌注法分离肝细胞，经预培养后冻存5周，复苏，台盼蓝检测新鲜分离肝细胞成活率，并体外培养肝细胞48h，用MTT法观察肝细胞活力，收集细胞培养上清检测谷白蛋白（Alb），乳酸脱氢酶（LDH）水平，检测肝细胞内活性氧（ROS）及丙二醛（MDA）含量。【结果】预培养组及各CGRP（10^-6，10^-7，10^-8）处理组细胞成活率（53±5，63±6，61±6，58±7）、Alb合成（4．8±0．6，6．5±0．7，5．8±0．7，4．9±0．6）及MTT活性（0．25±0．07，0．38±0．06，0．31±0．05，0．22±0．03）较对照组（46±7，3．9±0．6；0．11±0．01）显著增加（P〈O．05），且CGRP（10^-6，10^-7）处理组细胞成活率、Alb合成及MTT活性显著高于预培养组（P〈0．05）；预培养组及各cGRP（10^-6，10^-7，10^-8）处理组肝细胞复苏后48h内LDH释放（25±7，15±4，17±5，18±6），ROS释放（107士9．5，62±4．8，70±7．1，80±5．8）及MDA水平（0．87±0．1，0．70±0．06，0．76±0．07，0．80±0．07）较对照组（31±6，120±8．5，1．31±0．04）显著减少（P〈O．05），且与预培养对照组比较，CGRP（10^-6，10^-7，10^-8）各处理组LDH及ROS释放显著减少（P〈0．05），CGRP（10^-6，10^-7 。）处理组MDA释放显著减少（P〈0．05）。【结论】cGRP预培养对冻存引起的肝细胞损伤具有保护作用，其机制与抗氧化应激损伤有关。
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