作者:刘瑛; 张华莉; 袁灿; 王秋鹏; 刘梅冬; 涂...热休克反应热休克蛋白质类基因表达
摘要:[目的]观察热休克因子1(HSF1)在热休克反应中对Kruppel 样因子4(KLF4)基因表达的影响;采用生物信息学方法初步探讨KLF4在热休克反应中调控的下游基因.[方法]采用HSF1基因敲除小鼠热休克模型,抽提HSF1基因敲除小鼠(HSF1-/-)和野生型小鼠(HSF1+/+)心肌及肺组织的总RNA进行RT-PCR和Northern blot实验,观察KLF4 mRNA表达的情况.用热休克处理和HSF1过表达的小鼠RAW264.7巨噬细胞,抽提总RNA进行RT-PCR实验,观察KLF4 mRNA表达的情况;用TESS分析启动子含有KLF4结合位点的下游基因.[结果]热休克处理后,HSF1+/+小鼠组织中KLF4 mRNA的水平明显增加,HSF1-/-小鼠组织中KLF4 mRNA水平的增加明显低于HSF1+/+小鼠.小鼠RAW264.7巨噬细胞受热刺激后,KLF4 mRNA的水平明显增加;在HSF1过表达细胞中KLF4的表达也明显增高.经TESS软件分析发现6个启动子区含有KLF4结合位点的下游基因.[结论]HSF1诱导KLF4基因在热休克反应中呈现高表达.
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