作者：惠玲 王晓辉 王剑锋 张长菊 王美亮 贾庆...lmo3载体构建逆转录病毒载体plxsn
摘要：目的构建包含LM03（LIM-only3，LM03）全长基因的逆转录病毒表达载体，感染人神经母细胞瘤SK-N-AS，检测LM03对SK-N-AS细胞增殖的影响。方法将质粒pEGFP-Cl-一LM03经EcoRI和BamHI双酶切后亚克隆至逆转录病毒载体pLXSN，构建重组逆转录病毒表达载体pLXSN-LMO3，导人包装细胞pA317，获得逆转录病毒颗粒，感染SK-N-AS细胞，用RT-PCR及Western印迹鉴定，检测LM03感染后细胞的增殖及细胞周期分布情况。结果获得了能正确表达LM03基因的重组逆转录病毒表达载体pLX-SN-LMO3；LM03基因被逆转录病毒成功导入SK-N-AS细胞后，与对照组细胞相比，LM03感染组G1／G1期细胞减少，S期细胞增加，感染48h后，LM03感染组细胞的增殖能力显著高于空载体对照组及SK-N．AS组（P〈0．05）。结论成功构建了LM03基因的逆转录病毒表达载体，LMO3可以通过促进SK-N-AS细胞由G0／G1期进入S期，从而促进细胞的增殖。
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