作者：丛喆; 刘强; 刘浩; 陶真; 王卫; 蒋虹; 魏...shivsf162p3ccr5嗜性中国恒河猴外周血单核淋巴细胞
摘要：目的体外制备SHIVSF162P3中国恒河猴细胞适应株,建立病毒库,为模型制备提供生物学特性稳定的感染用病毒。方法用SHIVSF162P3体外感染中国恒河猴外周血单个核细胞（PBMCs）,定期测定培养液中的P24抗原水平。当病毒复制达高峰期时收集培养上清,分装并冻存。测定病毒RNA载量、P24抗原浓度和TCID50。利用病毒RNAenv区（M33262,6846bp～8481bp,共1636bp）序列分析的方法分析毒株在制备过程中的变异情况。静脉途径感染中国恒河猴G0801V,观察血浆病毒载量、外周血CD4＋/CD8的变化情况。结果本研究共制备了275mLSHIVSF162P3病毒,病毒载量为4.389×10^7copies/mL,P24抗原水平为5.64×10^2pg/mL,TZM-bl细胞滴定TCID50为8.37×10^4/mL。gp120序列测定分析表明病毒未发生变异,CCR5的嗜性也未发生改变。感染猴G0801V高峰期病毒载量超过1×10^8copies/mL,急性期CD4＋/CD8＋倒置。结论此次制备的SHIVSF162P3细胞适应株生物学特性稳定,适合作为毒种库构建SHIVSF162P3/中国恒河猴模型。
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