作者：张红梅; 王唯红; 徐文方明胶酶抑制剂微量分析方法高通量筛选法琥珀酰明胶反应时间吸收度分析法缓冲液检测限灵敏度rsd精密度抑制率酶活性测定本方线性
摘要：目的：建立一种通用的微量分析法筛选明胶酶抑制剂。方法：以琥珀酰明胶为底物，在pH=8．5，含Ca^2+ 10mmol·L^-1的50mmol·L^-1硼酸缓冲液中与明胶酶在37℃反应30min，然后加入0．03％的TNBSA，室温放置20min，在450nm处测定吸收度。结果：本方法对明胶酶的检测限为7．5ng，灵敏度随反应时间的延长而增加，吸收度在0-360min内与时间成线性，在7．5-480ng内与明胶酶的量成线性；以1，10-二氮菲为对照进行抑制率测定的日内及日间精密度RSD分别为1．5％和2．5％。结论：本方法不仅在检测明胶酶活性上可实现灵敏、快速、简便和微量，并可用于筛选明胶酶抑制剂，有望成为明胶酶抑制剂的高通量筛选法。
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