作者：成伟 王洁 孔令雪 齐霞 吴亚菲 赵蕾牙龈卟啉单胞菌口腔上皮细胞侵入差异显示pcr
摘要：目的：采用差异显示反转录PCR技术，比较牙龈卟啉单胞菌侵入口腔上皮细胞后基因表达的变化，初步筛选与细菌侵入宿主细胞相关的毒力致病基因。方法：提取纯培养状态和侵入KB细胞后的牙龈卟啉单胞菌ATCC33277细菌总RNA；反转录PCR技术显示cDNA表达条带；筛选并回收差异表达条带，二次扩增cDNA，经测序和BLAST同源性比对，初步分析细菌侵入KB细胞后表达差异基因的功能。结果：共筛选获得3条牙龈卟啉单胞菌侵入KB细胞后表达存在差异的基因HX01、HX02、HX03；BLAST同源性比对结果显示，HX01与牙龈卟啉单胞菌ABC转运蛋白编码基因PG0683具有96％的同源性；HX02与牙龈卟啉单胞菌PepO编码基因PG0159具有97％的同源性；HX03未找到类似同源性基因序列。结论：牙龈卟啉单胞菌在侵入KB细胞后发生了细菌毒力基因的表达变化，跨膜蛋白ABC转座子和PepO可能参与细菌侵入宿主细胞的致病过程。
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