作者：韩琪 刘建国 柴巧学 曲云鹏 管晓燕 白国...变异链球菌葡聚糖结合蛋白a哺乳动物细胞真核表达pvaxl
摘要：目的：构建变异链球菌葡聚糖结合蛋白A葡聚糖结合区的真核表达质粒pVAXl-GbpA／GBD，并观察其在哺乳动物细胞COS一7中的表达。方法：利用基因重组技术构建真核表达质粒pVAX1-Gb-pA／GBD，经酶切分析和测序分析鉴定后，通过脂质体转染法，将其转染至COS-7细胞中，免疫组化SABC法检测其在细胞中的表达。结果：重组质粒pVAX1-GbpA／GBD经EcoRI和BamHI酶切证实携带1．2kb目的基因片段，经测序分析，目的基因正确插入到预先设计的载体位点处。pVAX1-gbpA／GBD转染的细胞胞质呈褐色染色，pVAX1空载体质粒转染的细胞胞质中无着色。结论：成功构建防龋基因疫苗真核表达质粒pVAX1-GbpA／GBD，所携带的基因序列正确，能够在真核细胞COS-7中正确表达目的蛋白。
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