作者：刘青; 金岩; 吴织芬; 刘源; 邢向辉绿色荧光蛋白遗传载体牙龈上皮细胞
摘要：目的:构建TRAF-6与绿色荧光蛋白融合的真核表达载体,为研究其在口腔疾病发病中的作用奠定基础.方法:应用基因重组技术,将反转录PCR得到的TRAF-6基因,克隆入荧光真核表达载体pEGFP-N3中,用含卡那霉素LB培养基平板筛选转化菌,阳性重组子经HindⅢ和KpnⅠ双酶切分析、PCR鉴定.重组质粒酶切鉴定正确后,以脂质体转染牙龈上皮细胞.分别由间接免疫荧光和免疫组织化学检测目的蛋白的表达.结果:获得的TRAF-6基因重组真核表达质粒,经间接免疫荧光和免疫组化检测,TRAF-6成功转染上皮细胞.结论:成功克隆TRAF-6基因,构建了融合有TRAF-6基因的真核表达质粒,对其在体外进行了表达,并转染牙龈上皮细胞,为进一步的研究奠定了基础.
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