作者：张凤秋; 杨连甲; 吴织芬; 秦鸿雁; 臧晓霞牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶k牙龈蛋白酶k催化结构域基因疫苗
摘要：目的: 构建牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因的真核表达载体,并检测其在体外真核细胞中的表达情况.方法:利用基因重组技术构建牙龈卟啉菌牙龈蛋白酶K基因重组质粒pcDNA3.1(+)-KGPcd,然后通过脂质体将pcDNA3.1(+)-KGPcd瞬时转染COS7细胞,以RT-PCR和间接免疫荧光法检测重组质粒的转录水平和蛋白表达情况.结果:成功构建了牙龈蛋白酶K真核表达载体;转染的COS7细胞中可检测到目的蛋白的转录和表达.结论:成功构建了pcDNA3.1(+)-KGPcd真核表达载体并在哺乳动物细胞中能够正确转录和表达,为下一步作为基因疫苗免疫动物提供了依据.
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