作者:卢忠民; 赵春艳; 任凤; 崔秀云; 赵宝昌人白细胞介素18rgd模体毕赤酵母ecv304细胞
摘要:目的构建IL-18的定点突变体,并研究其对血管新生的抑制作用.方法利用基因重叠延伸剪接技术,在人白细胞介素18(IL-18)的cDNA序列中插入一个GGC序列,使IL-18第39位精氨酸和第40位天冬氨酸残基之间插入一个甘氨酸残基,从而构建了RGD模体.将此cDNA序列构建入表达质粒pPIC9K,并在酵母Pichia Pastoris GS115中得到高效表达.结果IL-18-RGD仍保存对PBMC诱导产生IFN-γ能力外,对ECV304细胞的增殖(IC50=7.80μmol/L)和对ECV304向Fn的黏附均具有明显的抑制作用,且呈剂量依赖关系;而野生型IL-18对ECV304细胞向Fn的黏附则没有作用.结论与野生型IL-18相比,IL-18-RGD增加了抗血管生成作用,从而增强其抗肿瘤能力.
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