作者：徐颖华; 张庶民; 侯启明; 雷殿良单克隆抗体纯化百日咳疫苗原液夹心elisa方法无细胞百日咳疫苗定量检测方法变异系数杂交瘤细胞亲和层析法mcabs平均回收率抑制试验抗原位点生产厂家质量控制a蛋白
摘要：目的纯化抗百日咳毒素(PT)的单克隆抗体(McAb),并建立特异、准确的PT定量检测方法.方法采用辛酸-硫酸铵沉淀法和A蛋白亲和层析法纯化杂交瘤细胞腹水,并经阻断抑制试验筛选识别不同表位的McAb,用于建立定量检测PT的ELISA方法.结果经SDS-PAGE分析,纯化McAb的纯度均在90%以上,选择二株识别不同抗原位点Mc从s,应用于检测PT的双抗夹心ELISA方法,灵敏度为2.14μg/L,批内变异系数5.85%,批间变异系数9.27%,平均回收率为108.12%,应用该法测定了国内几大生产厂家送检的无细胞百日咳疫苗原液中PT含量.结论获得了纯度高的抗PT McAb,建立了一种特异、准确的定量检测PT的ELISA方法,并用于无细胞百日咳疫苗原液中PT含量的检测,为无细胞百日咳疫苗的质量控制提供了有力的手段.
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