作者：王博; 邵美丽; 刘星; 谭秋花; 王雅静; 张...增殖凋亡凋亡抑制蛋白基因
摘要：目的 观察高表达miR-148a对卵巢癌细胞系-3（OVCAR-3）细胞增殖及凋亡的影响，并深入研究miR-148a对凋亡抑制蛋白（Livin）基因的作用机制。 方法 2016年10月—2017年12月在第四军医大学西京医院妇产科实验室进行实验。向培养的OVCAR-3细胞培养基中加入阴性对照（NC组）或miR-148a mimics（实验组），利用集落形成实验和CCK-8法检测转染miR-148a对OVCAR-3细胞增殖能力的影响；利用流式细胞计数法检测转染miR-148a后OVCAR-3细胞的凋亡情况；利用荧光素酶报告基因系统检测miR-148a对Livin mRNA 3’-UTR区稳定性的影响；利用Real time PCR（RT-PCR）和Western blot法检测Livin及Caspase-3的表达水平。 结果 集落形成实验和CCK-8结果显示，与NC组相比，实验组OVCAR-3细胞转染miR-148a后克隆形成率明显下降，细胞增殖受到显著抑制，且呈剂量依赖效应（ P 〈0.05）；OVCAR-3细胞转染miR-148a后能显著增加细胞凋亡的水平（ P 〈0.05）；荧光素酶报告基因系统结果提示，miR-148a能够与Livin mRNA的3’-UTR区特异性结合；RT-PCR结果和Western blot结果提示转染miR-148a后，Livin表达水平明显降低，而Caspase-3的剪切水平显著升高（ P 〈0.05）。 结论 miR-148a可以抑制卵巢癌细胞的细胞增殖，促进癌细胞的凋亡增加，其分子机制可能是通过抑制Livin的表达。
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