作者：徐志刚 穆敬中 吕淑慧 李宏 刘远光骨髓间充质干细胞共培养视网膜神经样细胞光感受器样细胞
摘要：目的探讨与新生鼠视网膜神经细胞共培养诱导骨髓间充质干细胞（bone marrow stromal cells,BMSC）的分化情况。方法体外贴壁培养法分离培养Lewis大鼠BMSC,记录BMSC的增殖情况并进行鉴定;制备细胞爬片并在双层培养板内与新生鼠视网膜神经细胞共培养,观察BMSC的神经存活和分化情况,并行免疫荧光染色鉴定。结果早期的BMSC分裂较缓慢,第2天进入快速增殖期,细胞生长活跃,大约持续至第5天,细胞分裂进入平台期,增殖缓慢或轻微下降。流式细胞仪显示,90.27%的3代BMSC处于G0-G1期,其余9.73%的细胞处于G2期、S期和M期;93.28%的4代BMSC处于G0-G1期,其余6.72%的细胞处于G2期、S期和M期。流式细胞仪检测示3代和4代BMSC抗原CD90＋/CD45-分别为92%、90%,体外获得了较高纯度的BMSC。MTT法检测共培养后3d、5d、7d的细胞存活率分别为（65.48±9.95）%、（73.56±8.68）%、（76.84±8.65）%,与对照组[（66.14±10.45）%、（70.11±9.60）%、（73.21±6.98）%]比较,差异均无统计学意义（均为P〉0.05）。免疫荧光染色显示,共培养组诱导后部分BMSC视蛋白、巢蛋白于3d后、微管蛋白于5d后出现阳性反应,对照组均为阴性。结论 BMSC具有向光感受器样细胞和视网膜神经样细胞分化的潜能。
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