作者：张静; 钱秀清; 张海霞; 时梅林; 刘志成小梁网双光子共聚焦显微镜schlemm管青光眼
摘要：目的观察基于双光子共聚焦成像技术在不进行组织固定和染色的情况下获取大鼠小梁网外流通道微观结构图像的应用效果。设计实验研究。研究对象 SD大鼠6只。方法将6只大鼠随机分成两组(A组和B组),A组大鼠的完整眼球用于小梁网通道纵截面成像数据的获取;B组大鼠左眼球剖开用于小梁网通道横截面及眼球矢状面成像,右眼球为对照组。采用自行搭建的双光子共聚焦成像系统(激发波长950 nm、侧向分辨率0.3 μm、轴向分辨率1.5 μm),从前房角处进行成像,获取不同方位小梁网及其周围组织的微观结构信息。通过图像处理方法,定量分析Schlemm管截面直径随成像深度的变化情况。主要指标不同方位小梁网通道成像深度、小梁网微观结构特点及Schlemm管平均截面直径。结果基于双光子共聚焦成像技术分别获取到小梁网通道纵截面、横截面以及眼球矢状面的图像数据。不同深度的小梁网通道组织形态结构各异,深层小梁网纤维排列致密,形成的孔隙较小;浅层小梁网的纤维相互交错,形成的孔隙较大,利于房水流出。在角巩膜缘下方190~215 μm成像深度范围内,Schlemm管的平均截面直径在34~68 μm之间变化。结论双光子共聚焦成像可观察小梁网通道的微观结构,为进一步小梁网通道房水外流动力学研究奠定了基础。
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