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对影响HBV-DNAPCR-ELISA定量方法测量精密度相关因素的探究

作者:尚文章; 罗云杰; 郭斌; 郭长河乙肝病毒脱氧核糖核酸聚合酶链反应酶免法精密度定量方法测量优化操作dna浓度

摘要:目的探讨影响HBV-DNA PCR-ELISA定量方法测量精密度的相关因素,以便优化各因素,从而提高测量的精密度.方法通过优化操作的时间、温度、特别是保证加液后的混匀、确保酶联后酶柱高度的精确、一致,以提高测量精密度.结果用优化操作方案与随意操作分别对HBV-DNA浓度值分别是5*104、5*105、5*106标样各测30次,得精密度(CV)分别是27.5%、21.6%、33.8%与78.5%、81.2%、116.7%.对30次测量结果进行配对t检验,P<0.01则优化操作的测量精密度显著高于随意操作法.结论对于HBV-DNA的PCR-EISIA定量方法,规范操作非常重要,若按本文建立的优化方案操作,可将方法测量CV值控制在一个较小范围内.

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