作者:郭昱嵩; 王中铎; 刘楚吾; 刘筠微卫星勒氏笛鲷pcr
摘要:采用PCR法快速筛选勒氏笛鲷(Lutjanus russelli)基因组文库,以获得(cA)。微卫星位点。勒氏笛鲷基因组DNA经限制性内切酶HaeⅢ+DraⅠ双酶切后,连接T-载体克隆,构建基因组文库。以通用引物M13+/-与重复序列引物(CA)15对基因组文库进行筛选,二次筛选后得到121个可能含有微卫星位点的阳性克隆。进行序列测定,共获得53个CA(n≥7)重复序列,重复次数主要分布于7-15(80.77%)。在所得微卫星序列中,重复单元除CA外,还观察到单碱基、三碱基、四碱基、五碱基重复单元。根据侧翼序列设计48对引物,通过优化PCR反应条件,可获得清晰可重复的目的条带。研究旨在为勒氏笛鲷遗传多样性研究及遗传图谱的构建等奠定基础,为勒氏笛鲷资源的合理开发利用提供参考。
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